三聚氰胺前处理柱主要通过吸附和洗脱的原理来工作。其填料通常具有特殊的化学性质,能够选择性地吸附三聚氰胺分子,而让其他杂质通过洗涤步骤被去除,从而实现对样品中三聚氰胺的净化与富集。常见的填料如高纯度和高交联度的苯乙烯 -二乙烯基苯聚合物颗粒,表面键合有反相(疏水成分)和强阳离子交换官能团,利用阳离子和反相两种吸附机理吸附呈弱碱性的三聚氰胺分子。
三聚氰胺前处理柱的种类:
-混合型阳离子交换柱(PCX):将磺酸基团(-SO3H)键合在高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯(PEP)吸附剂上,具有阳离子交换和反相吸附两种机理。可通过两种不同溶液的洗涤,使样品更干净,提高检测的灵敏度,批次重复性好,回收率高,重现性好,即使小柱跑干也可以得到较高回收率。
-ProElut Melamine 60mg / 3ml 50/pk:这是一种用于三聚氰胺的前处理小柱,以ProElut PXC为固定相,对三聚氰胺有较好的吸附和净化效果。
三聚氰胺前处理柱的使用流程:
-活化:使用适当的溶剂对前处理柱进行预处理,使填料充分润湿并处于良好的吸附状态。例如,可先用甲醇等有机溶剂冲洗,再用水或缓冲溶液平衡。
-上样:将提取得到的含有三聚氰胺的样品溶液缓慢通过前处理柱,三聚氰胺分子被吸附在填料上,而大部分杂质随溶液流出。
-洗涤:用合适的洗涤溶液对前处理柱进行洗涤,去除残留的杂质。一般会先用一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂交替洗涤,以提高净化效果。
-洗脱:选择合适的洗脱溶剂,将吸附在填料上的三聚氰胺洗脱下来,收集洗脱液,以便后续进行检测分析。