【MDS Express】多肽药物色谱分析全流程解决方案

更新时间：2025-08-07

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多肽作为由多个氨基酸通过肽键连接而形成的一类化合物，通常由10~100个氨基酸分子组成，具有高活性、低剂量、低毒性等特点，相对于小分子化药，具有更高的活性和更强的选择性。目前，作为多肽主流合成方法的化学固相合成法，具有研发周期短、可快速生产、纯度高的特点，尤其适合中短肽的合成。

多肽药物的分子量大小介于小分子化药和蛋白质药物之间，然而化学合成多肽药物在制备方法、结构确证和质量研究等方面均存在自身特性，无法简单将其归属于小分子化药或生物制品，由此在质量研究方面带来诸多挑战性。艾杰尔飞诺美专注于色谱分析领域解决方案，围绕化学合成多肽药物质量研究提供如下解决方案：

保护氨基酸手性分析

多肽有关物质固定相筛选组合

聚集体杂质SEC分析

氨基酸比值分析

有机酸残留分析

保护氨基酸手性分析

涂覆型和键合型多糖手性固定相，提供广泛对映选择性！

Lux 涂敷型和键合型手性色谱柱能够在效果上等同于其他多糖骨架和相似手性选择剂的色谱柱，同时大幅节省成本。在无法实现分离或需要提升分离度时，Lux 固定相还能为其他手性选择剂提供补充选择性。

色谱条件:

色谱柱:

• Lux 5 μm Cellulose-1 250 x 4.6 mm OOG-4458-EO

• Lux 5 μm Cellulose-2 250 x 4.6 mm OOG-4456-EO

• Lux 5 μm Cellulose-3 250 x 4.6 mm OOG-4492-EO

• Lux 5 μm Cellulose-4 250 x 4.6 mm OOG-4490-EO

流速: 1 mL/min

柱温: 室温

波长: 220 nm

进样体积: 5 μL

样品浓度: 2 mg/mL (Fmoc保护氨基酸标品溶于甲醇或乙腈, L:D=2:1)

表1. 19种常见Fmoc保护氨基酸手性分析汇总

^a蓝色高亮部分为D型保留时间

图1. FMOC-Asp(OtBu)-OH and FMOC-Tyr(tBu)-OH反相手性分析色谱图

多肽有关物质固定相筛选组合

色谱柱的特点

聚集体杂质SEC分析

Yarra 3μm高分离度尺寸排阻以颗粒为超纯硅胶，最小粒径为3μm超纯硅胶为基础，Yarra颗粒表面高密度键合了专有的亲水固定相配体。由于确保了一致的粒径和孔径分布，以及严格的填装和质检规格，Yarra 色谱柱可实现非常高的柱效和分离度。

氨基酸比值分析

Durashell AA 氨基酸分析方法试剂包是基于目前广泛使用的以OPA(邻苯二甲醛)和FMOC(氯甲酸-9-芴基甲酯)为衍生剂的柱前衍生HPLC氨基酸分析方法。该方法具有简便、快速、准确、无需要手动衍生，可全自动化在线分析等优点。是目前氨基酸分析中具有吸引力的分析方法之一。

图 1. OPA 在巯基试剂存在下与一级氨基酸的衍生反应图

图2. FMOC 与二级氨基酸的衍生反应图

液相色谱分析：

色谱柱：Durashell AA, 4.6*150 mm; 3 μm; 100 Å

柱温：45 ℃

波长：

• 一级氨基酸: 338 nm, 带宽 10 nm; 参比波长: 390 nm, 带宽 20 nm

• 二级氨基酸: 262 nm, 带宽 16 nm, 参比波长: 324 nm, 带宽 8 nm

狭缝：4 nm, 峰宽＞0.03 min

梯度洗脱程序：

混合氨基酸对照溶水解液相色谱图(一级氨基酸)

混合氨基酸对照溶液水解液相色谱图(二级氨基酸)

混合氨基酸对照溶液保留时间

利那洛肽样品溶液150℃下水解测试数据

有机酸残留分析

色谱条件:

色谱柱：Venusil MP C18；5 μm；4.6×250 mm，

流动相：A: 0.1%磷酸水 B: 乙腈；

流速：0.8 mL/min；

柱温：30 ℃；

进样量：1 μL；

波长：210 nm；