【热点】重组人源化胶原蛋白及其工艺杂质的SEC分析方案

胶原蛋白是人体中含量丰富的结构性蛋白质之一，约占总蛋白量的 25%-30%，广泛分布于皮肤、骨骼、软骨、肌腱、血管等结缔组织中。作为组织的 “建筑基石"，它不仅赋予皮肤弹性与张力，支撑表皮结构，还在关节润滑、伤口愈合、血管壁稳定等生理过程中发挥关键作用。随着生物工程技术的发展，重组人源化胶原蛋白凭借与人体天然胶原蛋白高度的序列同源性、优异的生物相容性及低免疫原性，逐渐取代传统动物源胶原蛋白，成为医美填充、皮肤修复、组织工程等领域的核心材料。其中，重组人源化胶原蛋白Ⅲ型因更贴近年轻肌肤中胶原蛋白的构成比例，在抗衰、嫩肤类产品中应用尤为广泛。

基于此，本实验采用Yarra SEC-2000 3um，7.8 x 300 mm 色谱柱（PN: 00H-4512-K0）建立 SEC 分离方法，对重组人源化胶原蛋白 Ⅲ 型（约 45KD）及其工艺杂质（约 35KD）进行分离分析。实验选用 50mM 磷酸钾缓冲液+ 100mM氯化-钾与乙腈 9:1 混合作为流动相，在 30℃柱温、0.5 mL/min 流速下进行检测。

 Yarra2000色谱图

绿：45kD蛋白；红：35kD蛋白；蓝：5% 杂质加标

结果令人振奋：胶原蛋白主峰峰形尖锐对称，塔板数高达8932，对称因子1.03，对于5% 加标杂质的样品，该方法实现了目标蛋白与杂质的有效分离，分离度达1.35，积分结果能准确定量各组分占比，为工艺优化与质量控制提供了可靠数据支撑。