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为提供可等同和互补选择性固定相,Kinetex 色谱柱具有 11 种选择性: PS C18、 Polar C18、EVO C18、XB-C18、C18、C8、Biphenyl、Phenyl-Hexyl、F5、PAH 和 HILIC(亲水相互作用液相色谱法),可以分离各种化合物,从极性到疏水性、芳香族和异构体。
疏水选择性其原理是用正戊基苯与正丁基苯的保留因子之比来衡量。这对探针分子在结构上仅相差一个亚甲基(-CH₂-)。一个理想的C18固定相应当能清晰“感知"并放大这种微小的疏水性差异,表现为该比值接近或略高于理论值。该参数主要受固定相表面覆盖度的影响,反映了固定相区分同系物疏水性差异的能力。
氢键容量的测定一般采用咖啡-因与苯酚在30%甲醇流动相条件下测试,计算两者的选择性因子 α(C/P) = k(Caffeine)/k(Phenol)。原理基于两者与硅羟基(Si-OH)相互作用机制的差异:咖啡-因是良好的氢键受体,能与未封尾的残余硅羟基形成较强的氢键,从而保留增强;而苯酚的保留受硅羟基影响的方式不同。因此,该比值的高低直接反映了固定相中残余硅羟基的含量与类型。
离子交换容量体现了固定相在不同pH下的表面电荷行为。这两项采用苄胺(碱性探针)与苯酚(酸性探针)分别在pH 7.6和pH 2.7的磷酸盐缓冲体系中测定的保留因子之比来衡量。
pH 7.6测试:
此时硅羟基部分解离,带有负电荷,可与质子化的苄胺发生阳离子交换作用。该参数反映了固定相在中性偏碱条件下的总硅羟基活性/离子交换能力。
pH 2.7测试:
在低pH下,硅羟基的解离被抑制,但金属杂质(如铁、铝等)可能成为更强的路易斯酸位点,与苄胺产生螯合或离子交换作用。该参数反映了填料表面的离子交换位点的数量大小。
增强极性基团的保留能力
改善碱性物质的峰形
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