色谱分析实战馆｜SPE柱回收率上不去？别让“过度干燥”背了锅！

更新时间：2026-03-27

点击次数：39

各位实验室伙伴，大家好！

为了帮大家高效破解液相分析实验痛点，咱们全新专栏【色谱分析实战馆】正式上线！本专栏主打一期一个小问题，不讲冗余理论，只讲实操干货，精准解决实验日常难题。

首期我们聚焦 SPE操作高频痛点：明明规范操作，目标物回收率却持续偏低、重现性差，深挖根源竟是极易被忽视的填料过度干燥。

样品回收率低？可能是过度干燥导致

核心原理说明

大多数采用硅胶基质填料的反相固相萃取（如 C18）应用中，小柱（或 96孔板）首先用有机溶剂（如甲醇）活化，随后用水或缓冲液平衡。

若硅胶基质 SPE填料在活化/平衡步骤中长时间干涸，会导致目标分析物保留变差，极性化合物尤为明显。

为什么过度干燥会导致保留变差？

C18固相萃取柱以硅胶为基质，表面键合十八烷基疏水长链，靠疏水作用吸附目标物，属于反相保留机制：

正常润湿状态下，C18 疏水链舒展，吸附位点充足，保留稳定；填料过度干燥后，硅胶表面硅羟基团聚缩合，会带动 C18 疏水链蜷缩折叠，有效吸附位点大幅减少；同时干涸填料难以被水溶液浸润，样品穿透分散快，最终导致目标物保留变差、回收率下滑。

因此，为获得准确、重现性好的结果，使用者必须在这一关键步骤中严格控制操作。

对照实验验证

我们用Strata C18‑T（1 g/6 mL）小柱开展对照测试，均上样 4 mL蓝色染料（CuCl₂）：

A 柱（过度干燥组）：先用 12 mL甲醇活化，高真空干燥10分钟，再用12 mL水平衡；结果显示蓝色染料在填料层中均匀分散，保留差、穿透明显。

B 柱（正常活化组）：甲醇活化后立即用水平衡，不进行干燥；结果显示蓝色染料在填料层顶部形成紧致、集中的条带。

防止意外过度干燥、避免分析物损失的要点

任何步骤均不可让填料层干涸（方法明确要求除外）。

用重力流替代负压真空，避免过度抽干。

采用低速离心（如 500 RPM）或正压操作。

改用聚合物基质等效填料：此类填料不会因间歇性干燥而出现保留与回收率波动。

本期实战小结

SPE 前处理出现回收率偏低的情况，填料过度干燥是活化平衡阶段极易被忽视的常见诱因，大家排查问题时可重点关注这一细节。

SPE 小柱，要“润"不要“干"，保留才稳，回收率才高！

日常做色谱分析、样品前处理时，你是不是也遇到过各种棘手难题？无论是耗材使用故障、数据异常排查、实验方法优化，还是其他想深入了解的色谱干货知识，都欢迎在评论区留言提问～我们会筛选高频问题，持续输出实用实操内容，陪大家攻克实验路上的每一个小障碍