【收藏】双酚A/F/S复合免疫亲和柱助力GB 5009.305-2025食品安全国家标准食品中双酚A、双酚F和双酚S的测定

更新时间：2026-03-27

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双酚类化合物（Bisphenols）是一类含有两个羟基苯基的有机化合物，广泛应用于塑料、树脂和其他工业产品中。其中，双酚A（BPA）、双酚F（BPF）和双酚S（BPS）是常见的几种。研究表明，双酚类化合物可能影响人体激素水平、生殖系统，具有致畸、致癌、致突变毒性，也会导致雌性早熟，增加患病风险，对健康产生不良影响，因此双酚类化合物的检测受到社会广泛关注。

GB 5009.305-2025 食品安全国家标准食品中双酚A、双酚F和双酚S的测定中明确规定了双酚A、双酚F和双酚S项目检测的基质、原理、前处理及分析耗材，其中双酚A/F/S复合免疫亲和柱，作为前处理重要的耗材产品，可广泛应用于肉及肉制品、乳及乳制品、水产品、谷物、蛋类、蔬菜、⽔果、饮料、婴幼儿配方食品和婴幼儿谷类辅助食品。

产品信息

产品亮点

国标认证

符合GB 5009.305-2025标准方法要求

稳准可靠

柱回收率＞92%，RSD＜3%

精准吸附

特异性抗体靶向捕获，抗干扰性强

产品参数

储存条件： 双酚A/F/S免疫亲和柱需在2-8℃条件下储存，不得冷冻。
保质期：在Z佳保存温度条件下，产品有效期18个月。
注意事项：为保证Z佳回收率，使用前，免疫亲和柱及待检样品需于18-25℃回温。为了不影响双酚A/F/S免疫亲和柱的净化和吸附效果，该免疫亲和柱使用前需要预活化处理。活化后的免疫亲和柱请于1小时内使用。

样品前处理方法

称量：称取1g（精确至0.01g）试样于50mL聚丙烯离心管中，加⼊50μL同位素内标混合液及50μL标准混合液；
提取：加标后振荡混合静置30min，加入10mL甲醇-水（80+20）涡旋混合30s，超声提取15min，4℃下10000r/min离心10min。取上清液置于15mL PP材质刻度离心管中，40 ℃下用氮气缓缓吹至约2mL，加⼊8mL PBS混匀，待净化。
活化：免疫亲和柱取掉上下盖，插在固相萃取缸上使液体自然流干，取1mL专用亲和柱活化剂加⼊柱管中，待柱中液体全部流过柱管，立即加⼊3mL 水淋洗小柱，待全部流出后，用10mL PBS溶液淋洗小柱（活化后的小柱要在1小时内使用）；
上样：将提取液全部上样过柱；
淋洗：待提取液自然流干，用10mL水淋洗免疫亲和柱，待流干，真空抽干1min；
洗脱：1mL甲醇洗脱小柱，15mL PP刻度离心管收集洗脱液，抽干；
浓缩：收集洗脱液于40℃氮气下缓缓吹干，准确加入0.4mL甲醇，涡旋混匀10s，再加入0.6mL水，涡旋10s，10000r/min 离心5min，上清液过0.22μm尼龙滤膜，上机待测。

*免疫亲和柱使用前恢复至室温（22~25℃）

*前处理方法以玉米基质为例，如需其他基质可详询飞诺美客服

液相条件

色谱柱:Kinetex^® 1.7 μm EVO C18 100 Å, LC Column 100 x 2.1 mm
货号:00D-4726-AN
流动相: A：水；B：甲醇
流速: 0.3 mL/min
柱温：40 ℃
进样量: 5 μL
梯度条件：

质谱条件

离子源类型：电喷雾离子源（ESI）
扫描方式：多反应监测负离子模式（MRM-）
喷雾针电压：-4500 V
离子源温度：550 ℃
加热器（GS1）：55 psi
辅助加热气（GS2）：60 psi
气帘气（CUR）：35 psi
碰撞气（CAD）：9 psi

为获得较好的稳定和灵敏度，各化合物监测离子对的去簇电压（DP）和碰撞电压（CE），目标化合物定量定性离子对参数均经过系统优化，优化信息参见表1。

表1.化合物定性、定量离子和质谱分析参数

表1中标“*"为定量离子

实验结果

标准曲线：

分别准确吸取标准混合液0.10 mL、0.20 mL、0.50 mL、0.80 mL、1.00mL、2.00mL于10mL容量瓶中，加入0.50mL同位素内标混合液，用甲醇-水溶液(40+60)定容至刻度混匀。标准曲线液中双酚A和双酚F的质量浓度分别为1.00μg/L、2.00μg/L、5.00μg/L、8.00μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L，双酚S的质量浓度分别为0.100μg/L、0.200μg/L、0.500μg/L、0.800μg/L、1.00μg/L、2.00μg/L，¹³C₁₂-双酚A和¹³C₁₂-双酚F的质量浓度为5.00μg/L，¹³C₁₂-双酚S的质量浓度为0.500μg/L。临用现配，浓度由低到高进样，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线见图1-3。线性回归方程见表2。

表2. 双酚A、双酚F、双酚S标准曲线

图1.双酚A标准曲线图

图2.双酚F标准曲线图

图3.双酚S标准曲线图

实验数据

表3. 柱容量加标回收实验结果

表4. 玉米基质加标回收实验结果

实验谱图

图4.玉米样品质谱图

实验结论

本实验重现了GB 5009.305-2025 食品安全国家标准食品中双酚A、双酚F和双酚S的测定，使用双酚A/F/S免疫亲和柱结合液质联用仪的检测方法对玉米（谷物）基质进行了双酚A、双酚F和双酚S的测试。试样中的双酚A、双酚F和双酚S，用甲醇-水溶液提取，免疫亲和柱净化，Kinetex EVO C18（2.1×100mm 1.7μm）液相色谱柱进行检测，采用内标法定量。结果表明，添加水平的相对回收率在80%~120%，RSD≤10%，能够满足检测要求。

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