【飞诺美色谱】色谱小知识丨高效液相色谱系统常用的检测器

高效液相色谱（HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC）检测器作为高效液相色谱仪的重要组成部分之一，它的作用是将流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，从而实现定性定量。HPLC检测器有多种类型，如何正确选择检测器很重要。由于样品组分在流通HPLC系统时会发生变化，因此选择哪种检测器主要取决于样品及其组成成分的性质，或者流动相和样品在通过HPLC系统时其组成发生变化的整体性质。下面咱们就从几方面来简单介绍下常用的几种高效液相色...

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【飞诺美色谱】生物探索 | 不同温度对单链寡核苷酸分析的影响

治疗性寡核苷酸的纯化及表征是目前制药行业的一大热点。然而，寡核苷酸的表征，特别是通过离子对反相液相色谱（IP-RPLC）进行表征，可能会非常具有挑战性。治疗性寡核苷酸是通过固相合成制造，也就是核苷酸以特定合成步骤进行循环。因此，我们必须对n-1和n+1等杂质进行表征，这其中可能需要大量的方法开发步骤来进行优化。此外，我们可能还需要对其他密切相关的杂质进行表征和定量，例如硫代磷酸酯的氧化。另一个挑战是在寡核苷酸分析中可能会观察到的色谱的变化。保留时间、峰形和峰面积回收率可能在一...

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在色谱宝库里，挖呀挖呀挖——方法开发中流动相pH的调节

【飞诺美色谱】作为微观世界探索者，色谱工作者有时候像一位运筹帷幄决胜于千里之外的战略家，有时候又像一位谋士，对微小的“变化”作出严谨缜密的判断。在方法开发过程中，pH就是分析胜败的关键因素，选择正确或优化的pH值往往是致胜关键一步。无论反相、HILIC还是离子交换模式，样品和流动相的pH值对于您的分析获得理想结果至关重要。那么，你知道pH的概念是如何产生的吗？pHpH的概念是丹麦化学家S.P.L.索伦森在1909年提出的。基本概念：pH是水溶性物质的酸度或碱度的量度。更复杂的...

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【飞诺美色谱】色谱小知识丨什么是柱外体积？

柱外体积是液相色谱中死体积重要的组成部分，它包括进样器体积，混合器体积，色谱柱前后连接管路的体积，连接配件等所产生的空间，以及检测器流通池体积。根据您使用的系统和应用，在HPLC上开发超高性能方法需要优化上述配件以减少柱外体积。测量柱外体积的方法等度法等度方法的系统体积测量相当简单，可以直接在系统上进行，而无需更改流动相。首先，取出HPLC色谱柱并用零死体积两通替换色谱柱。然后以固定流速启动HPLC，并在系统中注入少量丙酮或其他有UV吸收组分，并在270nm或220nm处进行...

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【飞诺美色谱】色谱小知识丨反相高效液相色谱法的优势

高效液相色谱法包括正相色谱和反相色谱两种，用于分离、定量、鉴定和分析化学或生物样品的成分。然而，这两种方法彼此之间有很大的不同，在大多数情况下反相HPLC是更好的选择。在正相HPLC中，样品的分离是通过在固定相中使用亲水性基团（容易溶于水或被水吸收）来完成的，使极性成分最后被分离出来。在这种情况下，固定相是极性的，而流动相是非极性的。在反相HPLC中正好相反。首先需要去除极性成分，并且在固定相中使用亲脂性基团（可以溶解在脂质、脂肪、油和非极性溶剂中）。在这种情况下，固定相是非...

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