丙酸及其相关的盐类在食品生产中发挥着巨大的作用,盐类中以丙酸钠和丙酸钙应用较广。丙酸钠和丙酸钙均具有良好的防霉作用,在糕点、面包和乳酪等食品中均有使用,其中丙酸钙用作防腐剂的同时还可补充食品中的钙质。然而,作为食品防腐剂的一种,丙酸及其盐类在食品中的量有严格规定,具体可参考下表(GB2760-2024)。
GB 5009.120-2025 食品安全国家标准食品中丙酸及其盐的测定中详细规定了相关分析物质的检测方法,飞诺美实验室在标准的基础上重现了面包基质丙酸及其盐类物质的检测方案,供实验室老师参考。
▸称量:称取5g(精确至0.01g)面包试样于 100mL烧杯中,加标;
▸提取:加水25mL,加入1mol/L 磷酸溶液 0.50mL,混匀,经超声浸提10min后,用1mol/L 磷酸溶液调pH为3左右。转移全部试样至50mL 容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。将试样转 移至50 mL 离心管中, 6000r/min 离心10min,待净化。
▸活化:Cleanert PEP小柱依次用5mL甲醇、5mL 水活化,保持柱体湿润;
▸上样:准确将 5.0mL样液上样过柱;
▸淋洗:用 5.0mL 甲醇-水溶液(10+90)淋洗小柱,真空抽干10min;
▸洗脱:5.0mL甲醇-水溶液(40+60)洗脱小柱,抽干;收集洗脱液并用甲醇-水溶液(40+60)定容至5.00mL,过0.45μm 尼龙滤膜,上机待测。
▸色谱柱:Venusil ASB C18,4.6×250mm,5µm(VS952505-0);
▸流动相:1.5g/L磷酸氢二铵溶液,用1mol/L磷酸溶液调pH 为3.0
▸流 速:1.0 mL/min;
▸柱 温:25 ℃;
▸进样量:20 μL;
▸检测波长:214nm
由于基质含有本底,故选择0.5g/kg高浓度添加计算回收率结果,基质添加浓度的回收率为105.52%,RSD为0.5%,具体见下表。
注:
实验时间建议一针60min,保证样品中干扰峰洗脱下来,否则会干扰下一针进样。
本实验重现了GB5009.120-2025 食品安全国家标准 食品中丙酸及其盐的测定,使用Cleanert PEP固相萃取小柱结合液相色谱的检测方法对面包基质进行了丙酸及其盐的测试。试样中的丙酸盐通过酸化转化为丙酸,超声波提取后,提取液调pH后定容,经Cleanert PEP,500mg/6mL(PE5006,)固相萃取柱净化, Venusil ASB C18(4.6×250mm 5μm)液相色谱柱进行检测,采用外标法定量。结果表明,添加水平的相对回收率为105.52%,RSD为0.5%,能够满足检测要求。