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柱外体积是液相色谱中死体积重要的组成部分,它包括进样器体积,混合器体积,色谱柱前后连接管路的体积,连接配件等所产生的空间,以及检测器流通池体积。根据您使用的系统和应用,在HPLC上开发超高性能方法需要优化上述配件以减少柱外体积。测量柱外体积的方法等度法等度方法的系统体积测量相当简单,可以直接在系统上进行,而无需更改流动相。首先,取出HPLC色谱柱并用零死体积两通替换色谱柱。然后以固定流速启动HPLC,并在系统中注入少量丙酮或其他有UV吸收组分,并在270nm或220nm处进行...
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高效液相色谱法包括正相色谱和反相色谱两种,用于分离、定量、鉴定和分析化学或生物样品的成分。然而,这两种方法彼此之间有很大的不同,在大多数情况下反相HPLC是更好的选择。在正相HPLC中,样品的分离是通过在固定相中使用亲水性基团(容易溶于水或被水吸收)来完成的,使极性成分最后被分离出来。在这种情况下,固定相是极性的,而流动相是非极性的。在反相HPLC中正好相反。首先需要去除极性成分,并且在固定相中使用亲脂性基团(可以溶解在脂质、脂肪、油和非极性溶剂中)。在这种情况下,固定相是非...
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手性化学自发现以来,在科学家研发创新药物过程中一直发挥着举足轻重的作用。这种描述了分子的三维空间的特征对色谱分离界产生了革命性的影响,从而诞生了手性化合物对映异构体的HPLC分离技术,即手性色谱法。随着手性药物的探索和发现,手性色谱得到了加速发展和创新进步。手性药物治疗作用的出现1848年,法国科学家LouisPasteur观察到天然的酒石酸铵钠溶液旋转了偏振光平面。而当他使用相同的条件检验合成的酒石酸铵钠溶液时候,却没有旋转。后来他对样品进一步的分析,注意到这些晶体实际上有...
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近些年微生物技术发展迅猛,在发酵制药生产中发挥的作用也越来越大,而且对全丨世界范围内的医疗事业和环境保护都有着积极意义,成为一种安全有效地生产价格低廉、纯净的生物制药的新途径。发酵完成后,发酵产物存在于发酵液中,包括菌体细胞、蛋白、糖、水等,提取产物成了一项非常重要的任务,下面分享一下提取发酵液中产物的一点经验。1样品处理:1.发酵液调酸,析出大部分蛋白(产物不怕酸的前提下,也可其他方法除蛋白)2.离心,过滤,除掉大部分菌体细胞和蛋白2样品分析条件:色谱柱:Phenomene...
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微观世界的分子中,像酮洛芬与自己镜像不能重合的现象称为手性(chirality),具有手性的分子称为手性分子(chiralmolecule)。其中心碳原子连接有四个不同的基团,我们把它叫做手性碳原子,以C*表示。这种互为镜像又不能重叠的异构体,我们称它们为对映异构体(简称对映体)图1.酮洛芬对映异构体“三点相互作用”理论目前,手性识别模型多是基于Dalgliesh在1952年提出的“三点相互作用”(Three-pointinteraction)理论:在一对对映体和手性选择剂之...
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